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用高效液相色谱法检测水中萘酚含量的原理是将一定量酸化后的样品（pH=1-2），用 C18固相萃取柱萃取，甲醇洗脱，洗脱液中的萘酚经液相色谱分离后，用荧光检测器检测。根据保留时间定性，外标法定量。此方法可以用于地表水、生活污水、工业废水中的萘酚测定，当取样体积为50ml，洗脱液体积为10.0ml，进样体积为10.0ul时，在发射波长425nm处，本方法测定1-萘酚和2-萘酚的方法检出限均为0.3ug/L，测定下限均为1.2ug/L；在发射波长360nm处，本方法测定2-萘酚的方法检出限为0.06ug/L，测定下限为0.24ug/L。
检测所用试剂和材料
1.乙腈（CH3CN）：液相色谱纯。
2.甲醇（CH3OH）：液相色谱纯。
3.盐酸：ρ（HCl）=1.18g/ml。
4.抗坏血酸（C6H8O6）。
5.1-萘酚：w（C10H7OH）≥99.5%。
6.萘酚混合标准贮备液：ρ≈1000mg/L。
分别称取0.10g（准确至0.0001g）1-萘酚和2-萘酚于100 ml烧杯中，加入100mg抗坏血酸（5.4），用少量甲醇（5.2）溶解，转移至100 ml容量瓶中，用甲醇稀释至标线，混匀。分装于棕色样品瓶中，密封，4℃以下避光冷藏，可保存3个月。
也可购买市售有证标准溶液，按标准溶液证书要求保存。
8.萘酚混合标准使用液Ⅰ：ρ=100 mg/L；
量取适量萘酚混合标准贮备液于10 ml容量瓶中，用甲醇定容，混匀。分装于棕色样品瓶中，密封，4℃以下避光冷藏，可保存3个月。
9.萘酚混合标准使用液Ⅱ：ρ=10.0 mg/L；
量取1.00 ml萘酚混合标准使用液Ⅰ（5.8）于10 ml容量瓶中，用甲醇（5.2）定容，混匀。于棕色样品瓶中，密封，4℃以下避光冷藏，可保存3个月。
10.盐酸溶液1+1。
11.盐酸溶液：c=0.01mol/L。
量取1.8ml盐酸溶液，用水稀释至1000ml。
12.固相萃取柱C18：填料为十八烷基键合硅胶，500mg/6ml。
13. 微孔滤膜：0.45um，有机相。
检测需要用的仪器
1. 高效液相色谱仪：配有多通道荧光检测器。
2.色谱柱：250 mm（长）×4.6 mm（内径）×5 µm（粒径），填料为十八烷基键合硅胶（C18）或其他等效液相色谱柱。
3.棕色采样瓶：250ml 或 500 ml 带聚四氟乙烯衬垫的螺旋盖玻璃瓶或磨口瓶。
4.棕色样品瓶：2 ml、10 ml 或 50 ml 带聚四氟乙烯衬垫的螺旋盖玻璃瓶。
5.气密性玻璃注射器：5 ml 或 10 ml，与微孔滤膜（5.13）配合使用。
6.固相萃取装置。
检测水样的制备
将C18固相萃取柱固定在固相萃取装置上，依次用9ml甲醇和9ml盐酸溶液活化固相萃取柱，始终保持柱头浸润。将样品平衡至室温，摇匀，量取10.0 ml-50.0ml样品（可根据样品中目标化合物含量，适当增加或减少取样量）于样品瓶中，然后使样品以3-4 ml/min流速通过萃取柱。在柱填料刚好暴露于空气之前，用5ml水，分2次冲洗样品瓶，洗涤液一并转移至柱上，弃去流出液，加压挤出或抽干萃取柱中的水分。用10.0ml甲醇洗脱，接收洗脱液，待初始洗脱液流出后，关闭活塞，浸泡固相萃取柱至少5min。打开活塞，收集全部洗脱液于10ml棕色样品瓶中，摇匀，用微孔滤膜过滤，待测。
水样检测步骤
仪器参考条件
流动相：乙腈/水（含0.2%甲醇）=47/53；流量：1.2ml/min；进样体积：10.0ul；
柱温：35℃；检测器：荧光检测器；激发波长：228 nm；
发射波长：同时测定1-萘酚和2-萘酚时，选425nm、435nm 或450nm；只测定2-萘酚时，选360nm、350nm。将其中一个波长作为检测波长，另一个作为辅助定性波长。
标准系列的配制
分别取适量萘酚标准使用液Ⅱ或标准使用液Ⅰ于10ml 棕色容量瓶中，以甲醇定容，配制能覆盖水样浓度范围的至少包含5个浓度点的标准系列。标准系列溶液配制及其参考浓度见溶液配制及其参考浓度表。
检测水样
按照仪器参考条件，由低浓度到高浓度对标准系列溶液依次进样，分离、检测目标化合物，记录保留时间和峰高。以各标准系列溶液中目标化合物的质量浓度（ug/L）为横坐标，以其对应的峰高为纵坐标，建立标准曲线。
检测水样
准备好的水样可以按照标准曲线建立中相同的仪器条件，按照水样的制备步骤进行检测。
定性分析
根据保留时间定性，也可根据试样中目标化合物在不同发射波长下的峰高比与标准水样比较（其相对偏差应≤5%）辅助定性。必要时，可用液相色谱-质谱法确认。
定量分析
用外标法定量。试样中目标化合物的响应值不应超过标准曲线的上限。否则，应将水样适当稀释后再萃取或适当减少取样量，计算时乘以稀释倍数。
最后通过相应的计算公式得出结果。
干扰和消除
1.水样中的萘胺类等碱性有机化合物，在酸性条件下（pH=1～2）固相萃取，以盐离子的形式存在于水相中，不被 C18固相萃取柱吸附，不干扰萘酚的测定。
2.水样中的多环芳烃类，在本标准规定的条件下，其响应值很低，一般情况下不会干扰萘酚的测定。
3.其他在荧光检测器上有响应的酸性和中性有机化合物可能会干扰萘酚的测定，可通过改变流动相的比例改善分离度，也可选择在相对无干扰的检测波长下测定避免干扰。
4.为避免固相萃取柱穿透，水样中目标化合物总含量一般不应超过200µg。否则，应将水样适当稀释后再萃取或适当减少取样量。
5.对于基体复杂、有机物含量未知的水样，为避免穿透，可以分别用两根固相萃取柱萃取不同体积的同一个水样。例如分别萃取10.0ml 和20.0ml，当后者的测定结果低于前者的20%时，即说明后者的吸附容量已达到饱和，需适当减少取样量或将水样稀释后再固相萃取。
6.对于清洁的水样，也可用微孔滤膜过滤后，直接进样。
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